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Nuevo método rápido de PCR para el diagnóstico de
Salmonella.
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A. Velilla1; S. E. Feingold2 y
H. R Terzolo3.
3Lab. de Bacteriología, E.E.A. INTA
Balcarce Ruta 226 - Km. 73,5. (C.C. 276) B7620EMA-Balcarce,
Argentina.; 2Lab. de Biotecnología Agrícola. E.E.A INTA
Balcarce.; 1Lab. de Bacteriología, E.E.A. INTA Balcarce -
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar
del Plata.
e-mail:avelilla@balcarce.inta.gov.ar
avelilla@mdp.edu.ar |
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INTRODUCCION
El Género Salmonella afecta a aves
de corral, vacunos, porcinos y ovinos, entre otras especies de
animales. Muy frecuentemente está implicado como causante de
enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs). Los métodos de
diagnóstico bacteriológico son laboriosos, requieren tiempo y no todas
las cepas aisladas pueden ser identificadas. La precoz detección e
identificación de los microorganismos implicados en las enfermedades
transmisibles prevendría los brotes producidos a escala nacional,
regional y mundial, y permitiría implementar la vigilancia y el
control epidemiológico de dichos microorganismos.
La técnica molecular de PCR (Polymerase Chain
Reaction) es una metodología expeditiva, sensible y confiable que
permite una mejor detección, identificación y caracterización de los
patógenos implicados. |
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METODOLOGIA
Objetivo I
- Se extrajo DNA [1] de 70 cepas
liofilizadas pertenecientes a 25 serovares de Salmonella
y de otros 20 Géneros bacterianos
- Se utilizaron macerados de bazo, hígado,
ovario y ciego de gallinas oralmente inoculadas con 108 CFU de S.
Enteritidis, se incubaron a 37°C en caldo Luria Bertani (LB) durante
24 hrs., se centrifugaron y del precipitado celular se extrajo DNA
[1].
- Se modificaron las condiciones de la
reacción de PCR y de los iniciadores empleados [2,3,4] para:
a) Detectar Salmonella spp.
b) Detectar cepas de Salmonella
portadoras del plásmido de virulencia Spv.
c) Identificar a la serovariedad Enteritidis.
Objetivo II
- Se probaron papeles absorbentes
especiales, como medio de transporte de bacterias para reemplazar a
los medios líquidos y a los soportes de plástico o de vidrio.
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Figura.
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RESULTADOS
Procedimiento a desarrollar para la detección e
identificación de Salmonella luego de recibida la
muestra en el Laboratorio de Bacteriología del INTA EEA Balcarce: (Figura).
Referencias Bibliográficas
- [1] Lagatolla, et al. (1996).
Journal of Clinical Microbiology. 34: 2440-2443.
- [2] Way, et al. (1993). Appl.
Environ. Microbiol. 59:1473-1479.
- [3] Agron, et al. (2001). Appl.
Environ. Microbiol. 67:4984-4991.
- [4] Chiu, C., & J. T. Ou. (1996). Journal
of Clinical Microbiology. 34:2619-2622.
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