Asistencia a establecimientos con problemas sanitarios
La asistencia in situ a establecimientos con problemas sanitario-productivos
se efectuó en 103 oportunidades (incremento del 26 %), recorriéndose una
distancia de 62260 km.
Diagnósticos destacados:
a. Intoxicación por algas verde-azuladas
El consumo de agua dulce de laguna, contaminada con algas verde-azuladas
produjo la muerte de 28 vaquillonas y la pérdida de alrededor de 50 kg en 140
animales. El caso se presentó en un establecimiento agropecuario ubicado en el
partido de Gral. Madariaga, en el mes de marzo.
b. Diplodiosis
Por primera vez en el país se diagnostica la intoxicación de bovinos por
consumo de maíz contaminado con Diplodia maydis. Se concurrió a un
establecimiento ubicado en Venado Tuerto, ante la muerte de 9 vaquillonas y
alrededor de 25 con signos nerviosos. Tras efectuarse la investigación
diagnóstica correspondiente se arribó al diagnóstico final.
c. Distomatosis
Este año se ha producido un aumento del área de distribución de Fasciola
hepática, este parásito necesita como vector a un caracol. Limnea viatrix,
presente en cursos de agua. La Fasciola ocasiona graves pérdidas de peso y
predispone al bovino para la aparición de otra enfermedad infecciosa, Hemoglobinuria bacilar. La aparición de distomatosis en nuevas áreas podría
relacionarse con los excesos de lluvias ocurridas en los 3 últimos años.
d. Patologías que ocupan espacios craneales (neuromeningitis granulomatosa)
En 5 establecimientos dedicados a Feed lot se presentó una afección común en
animales jóvenes manifestándose clínicamente por caída de uno o ambos pabellones
auriculares acompañado de parálisis del párpado y labio inferior. En algunos
casos esta afección era mortal en otros transcurría con pérdida de peso
importante. Tras efectuarse la investigación correspondiente, que abarcó necropsia, estudios bacteriológicos, virológicos, análisis bioquímicos y
toxicológicos, se identificó la patología responsable de la manifestación
clínica como una lesión cerebral inflamatoria de tipo granulomatosa, ubicada en
los espacios craneales donde desembocan los pares craneales VII y VIII.
Esta descripción patológica con presentación masiva, es la primera en el
país, desconociéndose por el momento su etiología.
e. Hipomagnesemia: ensayos de suplementación mediante el uso de rollos, con
Mg incorporado.
Objetivo: Evaluar y comparar la magnesemia en vacas adultas suplementadas
bajo dos estrategias diferentes. Una a partir de rollos magnesiados y otra
mediante la incorporación de óxido de magnesio en bateas. Los niveles séricos de Mg no superaron los valores normales, aunque los mayores niveles de Mg se
observaron en el grupo testigo. La suplementación con rollos magnesiados
incrementó en forma significativa (P< 0.05) los niveles de magnesio en suero en
el 2do muestreo. La suplementación con sales comerciales más rollo sin magnesio
produjo un aumento en los niveles de magnesio sin observarse diferencias
estadísticas. Estos bajos valores séricos de magnesio, pueden ser consecuencia
de: los valores de Mg y Ca en la dieta por debajo de los valores considerados
óptimos. Los valores de potasio altos al mayor potencial tetanizante de la dieta
en los grupos tratados por influencia de la mayor relación K/Ca+Mg de los rollos
suplementados. Los rollos fueron tatanizantes debido a los bajos valores de
calcio del suplemento. Pese a esto la utilización de rollos elevo los niveles de
magnesio. Las diversas variables que influyen sobre los valores de Mg en el
animal impiden obtener resultados concluyentes sobre los beneficios de la
utilización de rollos magnesianos; se requiere la repetición de este ensayo para
obtener datos más confiables.
ENFERMEDADES DE LA REPRODUCCIÓN DE LOS BOVINOS
1. TRICOMONIASIS
a. Colonización y patogenicidad de Tetratrichomonas sp. en el tracto genital
de hembras bovinas.
Se realizó un ensayo con desafío intravaginal con Tetratrichomonas sp. en 9
vaquillonas vírgenes Aberdeen Angus y cruzas Hereford, su seguimiento mediante
muestreos diarios y faena posterior. Para ello se efectuaron cultivos de mucus
cérvico vaginal (MCV) para identificación de protozoos en 385 oportunidades y
165 cultivos en materiales obtenidos a partir de los órganos genitales de los
animales.
b. Estudio de la inmunidad humoral en vaquillonas inmunizadas con diferentes
vacunas de Tritrichomonas foetus.
Se realizaron estudios microscópicos mediante el empleo de Lectinas para la
detección de antígenos de Tritrichomonas foetus (T. foetus) en genitales de
vaquillonas infectadas a los 70 días post desafio (PD) y 20 días PD. Se efectuó
además la puesta a punto y determinación de Ig genitales (IgG, IgA). Trabajo en
etapa de terminación.
2. NEOSPOROSIS BOVINA
a. Infección experimental con Neospora caninum en hembras bovinas preñadas.
El objetivo de este estudio fue reproducir experimentalmente la enfermedad
mediante la inoculación de N. caninum en 8 vacas por las vías endovenosa y
conjuntival y evaluar la respuesta inmune humoral materna y fetal (7 fetos)
mediante inmunofluorescencia indirecta (IFI). Para ello se diseñó ensayo E2/09
donde se procesaron 223 muestras séricas y fetales mediante IFI
b. Respuesta inmune de hembras bovinas lecheras preñadas inmunizadas con
antígeno de Neospora caninum inactivado.
Se utilizó un grupo de 26 vaquillonas lecheras las cuales fueron monitoreadas
serológicamente mediante IFI cada 30 días durante 12 meses previos al servicio
determinándose que 6 de ellas eran seropositivas con títulos ≥1:200. De igual
forma, se investigó la serología materna resultando seropositivas sólo las
madres de las 6 vaquillonas mencionadas anteriormente. Veintiuna de las 26
vaquillonas resultaron aptas para servicio, éstas fueron sincronizadas con
prostaglandina y fueron servidas a corral. A los 45 días de iniciado el
servicio, 9 animales se detectaron preñados mediante ecografía, 3/9 vaquillonas
eran seropositivas por IFI. Se formaron tres grupos experimentales: Grupo 1: 3
animales infectados naturalmente (seropositivas por IFI e hijas de madres
seropositivas); Grupo 2: 4 animales inmunizados con antígeno de N. caninum;
Grupo 3: 2 animales controles. El inmunógeno experimental se elaboró con una
cepa patógena de N. caninum Los taquizoítos de N. caninum se multiplicaron en
cultivos celulares, fueron cosechados durante su fase intracelular (1.35 x 108
protozoos/ml de inmunógeno), se inactivó con BEI. El adyuvante utilizado fue el
oleoso de INTA. Se administró la primera dosis de inmunógeno.
3. BRUCELOSIS BOVINA
a. Seguimiento serológicos en bovinos revacunados con vacunas experimentales
de cepas mutantes de B.abortus S19.
- Ensayo A: Se efectuó la revacunación por las vías subcutánea e intraconjuntival a vaquillonas previamente vacunadas cuando terneras con cepa
19, utilizando una vacuna experimental recombinante: Brucella abortus M1luc.
- Ensayo B: Se efectuó la revacunación por las vías subcutanea e
intraconjuntival en vacas previamente vacunadas cuando terneras con cepa 19,
utilizando una vacuna experimental recombinante: Brucella abortus INTA 2.
- Ensayo A: 8 vaquillonas fueron vacunadas vía SC (2.6x107 UFC/ml) y otras 8
por via IC (2.6x108 UFC/ml), 5 vaquillonas permanecieron como controles sin
vacunar.
- Ensayo B: 14 vacas fueron vacunadas via SC (6x107 UFC/ml) y otras 14 por
via IC (2.3x108 UFC/ml), 6 vacas permanecieron como controles sin vacunar
- En ambos ensayos se realizaron muestreos sanguíneos cada 15 días para
realizar estudios serológicos.
Resultados
- Ensayo A: 2/8 animales vacunados IC seroconvirtieron a los 20 dpv
negativizandose a los 35 dpv. Del resto de los animales sólo 2 resultaron
sospechosas inicialmente y se negativizaron 35 dpv. De los animales vacunados SC
8/8 seroconvirtieron a los 20 días pvc, a los 150 dpv perduro el titulo positivo
en 1/8 vaquillona y 2/8 sospechosas y el resto se negativizo.
- Ensayo B: 12/14 animales vacunados IC permanecieron seropositivos a los 20
dpv, a los 150 dpv 4/14 continuaban seropositivos. De los animales vacunados SC
14/14 resultaron seropositivas a los 20 dpv, mientras que a los 150 dpv sólo
2/14 continuaban seropositivos.
- Ensayos A y B: los animales controles permanecieron seronegativos durante
el transcurso de los trabajos.
b. Evaluación y aplicación de técnicas alternativas para el diagnóstico de
brucelosis bovina por técnicas microbiológicas, inmunoenzimáticas y de biología
molecular.
- Caracterización de cepas regionales de B.abortus mediante PCR.
- Un aislamiento de pulmón y liq abomaso de feto : resultado RB51, caso
clínico abortos 10-15 días pos vacunación con RB51 (prot.02/540).
- B.abortus aislada de semen de toros vacunados: resultado RB51.
- B.abortus aislada de semen de toros vacunados y desafiados con B.abortus
2308. Resultado cepa de desafío patogena B.abortus 2308.
c. Vacunación en toros adultos con Brucella abortus RB51 y desafío con
Brucella abortus 2308.
Objetivo: determinar la excreción y efecto sobre el tracto reproductor de la
vacunación en 14 toros adultos con Brucella abortus strain RB51 (SRB51) y
desafiados con Brucella abortus cepa 2308 (S2308). Los toros fueron
seleccionados de rodeos libres de la infección y todos fueron seronegativos.
Fueron asignados en 3 grupos: GI (n=6) toros vacunados subcutaneamente con
SRB51 (Schering-Plough), GII (n=6) no vacunados pero desafiados y G III (n=2)
como controles. A los 90 días posvacunación (PV) los toros de GI y GII fueron
desafiados intraconjuntivalmente con 5x107 UFC de S2308. Se examinaron
clínicamente los genitales, se tomaron muestras de sangre y semen, serologia y
cultivo, respectivamente hasta los 180 días posdesafío (PC) cuando los toros
fueron faenados. El tracto genital fue colectado para examinación macroscópica,
histopatología y cultivo bacteriológico
Resultados: A los 30 días PV, SRB51 fue aislada de semen de un toro (GI).
Ninguna alteración clínica o genital fue observada en ningún toro al momento de
PV. dos los toros vacunados con SRB51 no seroconvirtieron al momento PV. Los
toros del GI y GII presentaron títulos positivos a SAT y 2ME después del PC.
5/6 toros vacunados (GI) fueron positivos a 2ME a los 30 PC pero a los 75 dias
PC 3/6 permanecieron positivos. Los toros del GII fueron seropositivos para 2-ME
desde los 30 a 75 días PC. Toros del GIII fueron siempre seronegativos en todos
los muestreos. A los 45 PC, S2308 fue aislada desde el semen de un toro de GI.
Ninguna lesion macroscópica relevante fue observada en en análisis postmortem en
ningún toro. Brucella S2308 fue aislada desde el linfonódulo scrotal en un toro
de GI. Histopatológicamente, 2 toros de GI mostraron inflamación genital
(orquitis, epididimitis, ampullitis, seminal vesiculitis). Los toros del GII
mostraron solo lesiones inflamatorias menores en el tracto genital, mientras que
los toros del GIII no tuvieron lesiones. Bajo las condiciones de este estudio la
vacunación con SRB51 a los toros produjo excreción seminal y por lo tanto
debería tenerse precaución antes de usarse en toros adultos. Actualmente se esta
siguiendo el mismo esquema de ensayo pero usando un grupo de toros vacunados con
Brucella abortus M-1luc: por vía subcutánea con 2 ml de una suspensión de 3,0 x
106 bacterias (n=8 toros), 4 de dichos toros recibieron un refuerzo vacunal de
similar concentración celular de M-1luc a los 60 días posteriores por la vía
intraconjuntival. Durante el mes de febrero los toros serán enviados a faena y
se realizarán los estudios patológicos y microbiológicos en genitales.
d. Vacunación en toros adultos con una vacuna recombinante (M1luc) sin
proteína BP26 y desafío con Brucella abortus 2308.
Objetivo: determinar la excreción y efecto sobre el tracto reproductor de la vacunacion en 14 toros adultos con una cepa vacunal mutante (M1luc) y desafiados
con Brucella abortus cepa 2308 (S2308). Los toros fueron seleccionados de rodeos
libres de la infección y todos fueron seronegativos.
Fueron asignados en 2 grupos: GI (n=4) toros vacunados subcutáneamente con
M1luc, GII (n=4) no vacunados pero desafiados. A los 90 días posvacunación (PV)
los toros de GI y GII fueron desafiados intraconjuntivalmente con 5x107 UFC de
S2308. Se examinaron clínicamente los genitales, se tomaron muestras de sangre y
semen, serología y cultivo, respectivamente hasta los 180 dias posdesafío (PC)
cuando los toros fueron faenados. El tracto genital fue colectado para
examinación macroscópica, histopatología y cultivo bacteriológico. Los
resultados estáan en proceso de anáalisis.
e. Saneamiento de rodeos
Se efectuaron análisis serológicos para diagnóstico de Brucelosis en el marco
de la campana de control y erradicación de la enfermedad o derivados de ensayos
de INTA aplicando las técnicas de BPA, SAT, 2ME y Fijación de complemento en
bovinos (n= 4108 sueros), BPA y Fijación del complemento en caprinos (n= 2500
sueros) y ELISA indirecto para Brucella ovis (n= 2000).
f. Servicio de referencia (diagnóstico serológico con técnicas no
convencionales, microbiológico, control de calidad, capacitación).
4. CAMPYLOBACTERIOSIS GENITAL BOVINA
a . Infección natural y experimental con Campylobacter fetus en vaquillonas y
toros.
Se utilizaron 16 vaquillonas vírgenes y negativas a organismos venéreos
los cuales fueron desafiados en forma natural y artificial con cultivos de Campylobacter fetus.
b. Desarrollo y evaluación de vacunas: Vacuna experimental dual contra
Tricomoniasis y Campylobacteriosis
Se están utilizando 62 vaquillonas Aberdeen Angus, Hereford y sus cruzas de
18 a 24 meses de edad provenientes de rodeos libres de enfermedades venéreas y
brucelosis. Un total de 21 vaquillonas fueron vacunadas con una vacuna comercial
(Grupo 1) con antígenos de T. foetus, C. fetus venerealis y Leptospira canicola,
grippotyphosa, icterohaemorrhagiae y pomona (Trichguard V5L, Fort Dodge). Otras
20 vaquillonas fueron inmunizadas con una vacuna experimental (Grupo 2)
conteniendo antígenos de T. foetus y C. fetus subspecies. Las cepas utilizadas
de T. foetus y C. fetus fetus, C. fetus venerealis intermedius y C. fetus
venerealis fueron obtenidas de casos de abortos, piómetras y desarrolladas en
medios de cultivos y atmósferas adecuadas e inactivados con formol (0.5%). Se
preparó la vacuna mediante emulsión con 30:70 volúmenes de adyuvante oleoso (Marcol
52, Arlacel C y Tween 80). Las restantes 21 vaquillonas (Grupo 3), recibieron el
adyuvante solo (controles sin vacunar). Los animales de los Grupos 1 y 3 fueron
vacunadas por vía subcutánea a los 60 y 30 días pre-servicio (-60 y -30 dps).
Las vaquillonas del Grupo 2 fueron inmunizadas por vía subcutánea a los -30 dps
y +11 días post inicio del servicio, y además por vía intravaginal a -9 dps.
Todas las vaquillonas están en servicio con toros infectados y se prevé desafiar
a la mitad de cada grupo por instilación intravaginal con C. fetus venerealis y
T. foetus. Se están realizando cultivos de muestreos genitales y sangrados para
las pruebas de medida de inmunidad humoral mediante Elisa para ambos agentes. Se
evaluará preñez y persistencia de infección.
c. Respuesta humoral en toros a vacunas específicas contra Campylobacteriosis
bovina.
Con el objetivo de evaluar qué tipo de respuesta inmune humoral desarrollan
las vacunas específicas contra Campylobacteriosis en los toros jóvenes/adultos
libres de infección. Se están empleando bacterinas comerciales nacionales no
evaluadas hasta el presente mediante diferentes esquemas de vacunación y luego
determinar los anticuerpos séricos generados medidos por ELISA. Para ello se
utilizaron 3 vacunas comerciales (Vibriosan, Campy3 y Campy 40) en 218 toros de
cabañas de la zona y de las reservas ganaderas del INTA. Este ensayo se
encuentra en realización.
5. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE CASOS DE ABORTOS
Se realizó el examen de 219 fetos Bos taurus y 34 £ terneros de una semana de
vida de rodeos lecheros y carne suministrados al SDVE (2001 a 2003). Los fetos
abortados fueron de rodeos lecheros (21/219, 9.6%) y para carne (163/219,
74.4%), respectivamente. En 35 de estos casos (16%), el origen del rodeo no fue
determinado. Los terneros de £ una semana de vida fueron 28 (82.3%) de rodeos
para carne y 5 (14.7%) de rodeos para leche. Muestras de los fetos y terneros
fueron recolectadas para identificar organismos patógenos y procesados para
examen histopatológico. En aquellos casos donde las lesiones histopatológicas
fueron compatibles con aborto a protozoo, se realizó la inmunohistoquímica para
Neospora caninum. Se determinaron los anticuerpos en fluidos fetales para N.
caninum, diarrea viral bovina (BVDV) y herpes virus bovino tipo 1 (BHV-1). Las
causas del aborto fue determinada en 66 (30.1%) y no determinada en 153 (69.9%)
fetos. Los agentes Infecciosos fueron identificados en 54 (24.7%) fetos siendo
los agentes bacterianos en 42 (19.1%), los más frecuentes fueron Leptospira
interrogans, Brucella abortus, Campylobacter fetus en 14, 12 y 8 cases,
respectivamente. N. caninum fue identificada en 12 (5.5%) casos Otros agentes
bacterianos misceláneos fueron aislados en 8 casos. Las causas no infecciosas
fueron establecidas en 12 (5.5%) casos, anomalía congénita, distocias,
momificación y mellizos se observaron en 2, 6, 3 y 1 caso, respectivamente. La
respuesta fetal humoral hacia N. caninum, BVDV y BHV-1 fueron encontradas en
23/166 (13.8%), 7/145 (4.8%) y 8/145 (5.5%), respectivamente. Mediante el examen
histopatológico realizado en casos indeterminados, 94/153 de ellos tuvieron
lesiones compatibles con agentes infecciosos. Las causas determinadas de perdida
perinatal fueron encontradas en 5/34 (14.7%) casos siendo agentes bacterianos en
4 (11.7%) y causas no infecciosas en 1/34 (2.9%) casos. Con causas no
determinadas pero con lesiones histopatológicas se detectaron 17/29 terneros.
TUBERCULOSIS Y PARATUBERCULOSIS BOVINA
a. Identificación de las proteínas de Mycobacterium bovis a través de la
respuesta inune en bovinos.
Este trabajo se focaliza en la identificación y caracterización de proteínas
antigénicas individuales. Su finalidad es poder entender los mecanismos de la
patogenia de la micobacteria como así también la respuesta inmune que se genera
contra ellas. Se empleó en este estudio una cepa de referencia patógena de
M.bovis (AN5). Se utilizaron dos metodologías para el fraccionamiento de las
proteínas del filtrado del cultivo (FC) y del extracto: cromatografía líquida de
intercambio aniónico (FPLC) y electroelución. El primer procedimiento no
desnaturaliza las proteínas y, además, permite la medición de su antigenicidad
en una mezcla de potenciales proteínas de diverso PM. Con la segunda técnica se
obtienen mezclas de proteínas desnaturalizadas de semejante PM. Sobre ambos
tipos de fracciones, mediante el ensayo de linfoproliferación, se reconocieron
las más estimulatorias al enfrentárselas con la población de linfocitos T de
bovinos experimentalmente infectados con una cepa de M.bovis salvaje. Se
aislaron las proteínas individuales de las fracciones antigénicas seleccionadas
mediante electroforesis en 1D y en 2D. Las proteínas fueron identificadas por la
secuencia N-terminal (EDMAN) o MALDI-TOF. Las proteínas del FC identificadas
fueron: ESAT-6, CFP10, MPB70, TPX, 85B, MPT50, Rv2624c y una nueva proteína no
descripta en la literatura: TrbB. Todas ellas estaban asociadas a fracciones
proteicas de alto índice de estimulación de la población de linfocitos T. Estos
resultados refuerzan el concepto de que algunas proteínas de bajo PM tales como
ESAT-6 y CFP10 juegan una importante función en la respuesta inmune. En las
fracciones del extracto de alto índice de estimulación se identificaron la
proteína Rv3747(que es también una nueva proteína no descripta en la literatura)
y la proteína denominada L7/L12.
Los genes de esta proteínas fueron clonados y se obtuvieron las respectivas
proteínas recombinantes que, luego de ser purificadas, se evaluaron con ganado
experimentalmente infectado a través del ensayo de gamma interferón (g-IFN).Estos
ensayos señalaron a ESAT 6 y a CFP10 como excelentes marcadores de infección
durante el transcurso de toda la enfermedad, razón por lo cual sería muy
importante su aplicación en el diagnóstico de la tuberculosis bovina en relación
al ensayo de g-IFN. Se suma a ello que CFP10 no presenta reacción cruzada con
ninguna proteína de M.avium lo cual hace que sea una proteína muy importante
para la diferenciación entre otras micobacterosis y tuberculosis bovina. Los
antígenos TPX y TrbB no estimulan en forma contínua a lo largo de toda la
infección, pero, cuando lo hacen, producen picos de altos índices de
estimulación lo cual indicaría que estas proteínas estarían relacionadas o
serían sensores de las distintas etapas del proceso infeccioso.
b. Pruebas de ELISA con antigenos recombinantes de Mycobacterium bovis.
Se ensayaron sueros bovinos de animales positivos a tuberculina de un tambo
sanitario de la Provincia de BsAs (n=10), sueros negativos de un tambo de la R.O.
del Uruguay (n=10) y de Irlanda (n=10), sueros de bovinos con Tuberculosis,
intradermoreaccion positiva, serologia positiva y aislamiento y tipificacion por
PCR de M.bovis (bovinos adultos TBC cronica n=3 y terneros con TBC aguda n=4);
Sueros de bovinos con sintomatología y aislamiento de Mycobacterium avium subsp
paratuberculosis y confirmacion por la técnica de PCR para identificacion de
IS900.
Se utilizaron los antigenos de M.bovis : TRBb, MBP70, MBP64, MBP85, ESAT 6,
L7L12, Rv2624 c, TPX, DES, P36, todas fracciones proteicas con potencialidad
antigenica en la contra la respuesta inmune a la infeccion con Tuberculosis
bovina. Ademas lo sueros se probaron frente al PPD bovino utilizado para la
prueba de intradermoreacción y frente a PPDaviar para identificacion de
reactores a M.avium
Se ensayaron 5 distintas concentraciones de antigeno (1000, 100, 50 y 25 ug
en placas de ELISA, 3 diferentes concentraciones de 2do anticuerpo anti-bovino,
midiendo la reaccion a diferentes tiempos de lectura y con modificaciones de la
técnica original para identificacion de seroreactores a tuberculosis.
Los resultados obtenidos de manera preliminar indicaron que:
- La concentración de Ag proteico más adecuada para identificar a los seroreactores a tuberculosis fue la de 50 ng/well.
- Los sueros de bovinos con TBC crónica y aislamiento de M.bovis reaccionaron
adecuadamente con todos los antígenos probados y la DO permitió discriminar
entre estos y los animales negativos a TBC.
- Los sueros de terneros no reaccionaron como animales positivos a pesar del
aislamiento de M.bovis de linfonodulos y tuberculinización positiva.
- Los sueros de animales positivos a paratuberculosis fueron reaccionantes a
P36 y PPDaviar (21,5%), TPX, TRBb y 2624 (28%,50% y 43% de seroreactividad) lo
que indica que existiría un grado importante de reactividad cruzada con animales
infectados con M.paratuberculosis y determinando menor especificidad en pruebas
de ELISA para tuberculosis.
- Los resultados preliminares indican que una suma de antígenos proteicos
seleccionados mediante estas pruebas podría mejorar la especificidad y
sensibilidad del diagnóstico serológico por ELISA en Tuberculosis.
c. Comparación preliminar de diferentes métodos serológicos para el
diagnóstico de la tuberculosis bovina.
En este trabajo se comparan métodos serológicos de diagnóstico como ELISA,
MAPIA (Multi antigen printed immune assay) y Western blot para el diagnóstico de
la tuberculosis bovina con el mismo lote de sueros de provenientes de animales
tuberculosos y sanos. .Los animales tuberculosos son de un rordeo sanitario y
otro con alto grado de prevalencia de TB bovina en la provincia de Buenos Aires,
mientras que los animales sanos son de Uruguay o de Irlanda, ambos países con
avanzadas campañas de control de la tuberculosis bovina. Los antígenos empleados
son extracto total y sobrenadante total de M. bovis, PPD, MPB70, MPB64, ESAT6,
Ag2624, TRB, TPX, L7L12, ESAT6, DES, P36, MBP64 y MPB83 y algunos antígenos de
M. paratuberculosis. También se incluyó un ensayo de liberación de gIFN usando
los mismos antígenos. El método serológico de mayor sensibilidad fue el MAPIA y
los antígenos mas reconocidos fueron extracto celular, y sobrenadante de cultivo
de M. bovis, PPD bovina, MPB83 y MPB70 en ese orden. Sin embargo la
especificidad del extracto celular y del sobrenadante de cultivo de M. bovis fue
baja ya que son reconocidos por los sueros de bovinos sanos provenientes de un
área que lleva varios años de una efectiva campaña de control de la tuberculosis
bovina. Estos resultados distinguen a MPB83 como un antígeno inmunodominante en
serología.
En conclusión, este trabajo indica que varios antígenos de M. bovis pueden
ser usados para el diseño racional de nuevos métodos de diagnóstico de la
tuberculosis bovina.
d. Ensayos con nuevas proteinas de Mycobacterium avium susp paratuberculosis.
Una nueva lipoproteína de 20.9 kDa fue identificada a partir de una library
de expresion en M.paratuberculosis la que fue usada para inmunizar roedores y
estudiar la respuesta inmune al nuevo antígeno clonado. El suero policlonal fue
usado en muestras de bovinos y ovinos por inmunoblot dando una clara reactividad
y reconociendo los animales infectados lo que demuestra que podría ser una
potencial proteína antigénica para el diagnóstico de paratuberculosis.
e. Identificación de cepas de M.paratuberculosis en leche de consumo y
experimentalmente infectadas.
El trabajo pretende identificar la presencia de cepas de M.paratuberculosis
presentes en leches de consumo humano para determinar el posible riesgo de la
trasmisión y su probable efecto zoonótico como desencadenante de la Enfermedad
de Crohn. Se han cultivado más de 40 muestras de leche y se han identificado
cepas positivas al cultivo y a la prueba de PCR.
Además se han determinado algunos factores inherentes al procesamiento de la
leche para la fabricación de quesos, lo que permitiría mejorar la calidad del
producto final si se conociera la persistencia o no de las cepas durante la
maduración de quesos para consumo.
f. Saneamiento de rodeos con PTB.
Se continuó con el seguimiento de rodeos
bovinos y de cérvidos seroreactores a paratuberculosis, identificando cepas de
materia fecal y órganos, caracterizando la patología asociada. Se probaron
diferentes kits de ELISA Parachek (New Zealand), Pourquier (Francia) y ELISA
INTA, para conocer sus diferencias en cuanto a sensibilidad y especificidad) con
sueros de animales infectados con aislamiento de Mptb y sueros de rodeo general
negativos, resultando en todos los casos mayor sensibilidad de este último con
respecto a los importados.
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
Una actividad importante de la vigilancia epidemiológica es el diagnóstico
diferencial de enfermedades con signos neurológicos de los bovinos de más de 24
meses de edad. El Grupo de Sanidad Animal del INTA Balcarce forma parte de la
red de Laboratorios de Diagnóstico Veterinario receptores de material donde se
realiza un diagnóstico diferencial primario y luego el material es remitido al
Centro Nacional de Referencia de la EEB que está en INTA Castelar donde se
aplican técnicas de diagnóstico más complejas.
Como parte del Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado se
recibieron 942 consultas. El 91 % correspondió a bovinos. En 36 casos se trató
de enfermedades con algún signo neurológico: Anaplasmosis, Coccidiosis,
hipomagnesemia, intoxicación por Claviceps purpurea y paspali, intoxicación por
órganofosforados, intoxicación por Diplodia maydis, intoxicación por paspalum
spp, polioencefalomalacia y listeriosis. Durante este período se recibieron y
procesaron 37 cerebros de bovinos mayores de 2 años. En ningunos hubo lesiones
microscópicas sospechosas de BSE.
BRUCELOSIS CAPRINA (Brucella melitensis)
Relevamiento serológico en caprinos en un área de La Rioja con brucelosis
humana. Como resultado de un brote de brucelosis humana el gobierno de la
provincia de La Rioja con la delegación local del SENASA realizó un estudio
serológico en un departamento del norte de esta provincia. Se analizó un segundo
lote de 2136 sueros de caprinos de 36 puestos del departamento Famatina. La
seroprevalencia cruda fue del 4,5 %. En 14 de los 32 puestos se detectaron
reactores serológicos con un prevalencia del 4 al 20 %. La dispersión geográfica
no es homogénea y la prevalencia interpredios relativamente baja lo que
indicaría reciente introducción de la infección y/o escaso movimiento entre
distritos y predios.
SALMONELOSIS AVIAR
a. Evaluación de vacunas contra la Salmonelosis de las aves
El objetivo es evaluar la efectividad de vacunas vivas atenuadas comerciales
para prevenir la salmonelosis de los pollos en modelos experimentales del INTA.
Doscientos noventa y cuatro (294) gallinas fueron divididas en once grupos
experimentales. Nueve de estos grupos fueron vacunados con una, dos o tres dosis
de la vacuna viva TAD Salmonella Vac® E: al 1° día de vida, a la 7° semana de
vida, a la 16° semana de vida y a la 47° semana de vida. Cuatro de estos grupos
(B, D, G y K) fueron vacunados sólo una vez en las citadas edades, otros cuatro
(A, C, F y J) fueron vacunados dos veces combinando las mencionadas distintas
edades de vacunación y otro grupo (E) fue vacunado tres veces, al 1° día, 7°
semana y 16° semana de vida. Otro grupo(H) fue vacunado dos veces con la vacuna
INACTI/VAC SE4® a las 12 y 16 semanas de edad. El último grupo (I) fue un grupo
control sin vacunar.
Cuando los grupos de gallinas vacunados se compararon con el grupo control
sin vacunar, se observó que las vacunas no afectaron la producción de huevos en
ninguno de los grupos vacunados ni causaron ninguna alteración entérica o
síntoma clínico alguno. A la edad de 29 semanas 129 gallinas y la edad de 55
semanas 165 gallinas fueron oralmente desafiadas con una cepa patógena de
Salmonella Enteritidis. En ambos ensayos un tercio de las aves se sacrificó al
5°día post-desafío y el resto al 15° día post-desafío. Las aves desafiadas en el
pico de la postura (29 semanas) fueron más susceptibles que las gallinas que ya
no estaban en su máxima producción de huevos (55 semanas). Se demostró así la
influencia del estrés de postura como una causa de la mayor susceptibilidad de
las gallina ponedoras en producción intensiva.
Cuando las aves vacunadas se compararon con el lote control sin vacunar se
demostró que la vacuna viva TAD Salmonella Vac® E había protegido
significativamente a las gallinas mediante: 1) Reducción de la excreción de
Salmonella Enteritidis en las heces; 2) Recuperación más rápida de la postura;
3)Disminución del porcentaje de aves infectadas; y 4) Aumento de la velocidad de
eliminación de Salmonella Enteritidis de los órganos internos.
Se demostró que la infección de los huevos fue debida a una contaminación de
la cáscara de los huevos y en ningún caso pudo detectarse una infección directa
transovárica de las yemas; por ello la reducción de la excreción estuvo
significativamente relacionada con una reducción equivalente de la Salmonella
Enteritidis en los huevos. Esta protección para la transmisión de las salmonelas
en los huevos ocurrió tanto con la vacuna viva atenuada TAD Salmonella Vac® como
con la inactivada INACTI/VAC SE4®. Si bien ambas vacunas fueron igualmente
eficientes para disminuir la transmisión de la salmonelas a los huevos, la
vacuna viva fue la única que además proporcionó una reducción significativa de
las salmonelas en los órganos de las gallinas desafiadas.
La protección de las aves que recibieron una la tercera dosis vacuna viva
atenuada TAD Salmonella Vac®, administrada a las 16 semanas de edad, fue
significativamente mejor que las aves que sólo recibieron dos dosis esta misma
vacuna al primer día de vida y a la 7° semana de vida. Esta protección fue mucho
más reducida si las aves sólo se vacunaron al 1° día de vida. Por otro lado la
cuarta dosis de vacuna viva, administrada a las 47 semanas de vida y sólo 9
semanas antes del desafío, no mejoró la protección conferida por la tercera
dosis de la misma vacuna. Es por lo tanto recomendable vacunar tres veces, al 1°
día de vida y luego re-vacunar a la 7° y 16° semana de vida con la vacuna
atenuada para lograr una adecuada protección durante 55 semanas del ciclo de
vida de la gallina ponedora. Esta protección resulta muy eficiente para reducir
el riesgo de transmisión de Salmonella Enteritidis a los huevos destinados al
consumo humano.
La vacunación de las aves ponedoras es fundamental y debería ser obligatoria
para reducir la salmonelosis humana y los brotes de intoxicaciones alimentarias.
Adicionalmente estos ensayos demostraron que las salmonelas son difíciles de
aislar de los órganos internos de las aves por estar transformadas dentro de las
células del Sistema Retículo Endotelial, siendo posible incrementar su
aislamiento mediante el empleo de pasajes sucesivos en medios de cultivo de
enriquecimiento selectivo y no selectivo y medios con protección osmótica para
el aislamiento de bacterias en fase lisogénica con pérdida de pared celular. A
pesar del empleo de todos estos métodos, mediante la biología molecular por la
técnica de PCR específica para Salmonella Enteritidis se pudo determinar la
existencia de formas no cultivables en órganos que habían sido
bacteriológicamente negativos. Estas formas intracelulares no cultivables
constituyen un reservorio de la infección latente en las aves portadoras y
explican la persistencia de la infección en aves aparentemente negativas.
Además, mediante estudios combinados de bacteriología estándar y biología
molecular por PCR se pudo corroborar la desaparición total de la cepa vacunal de
las aves vacunadas, demostrando la alta seguridad biológica de la vacuna
atenuada TAD Salmonella Vac®.
b. Desarrollo de un modelo experimental aplicado a la evaluación de vacunas y
flora competitiva para el control de la Salmonelosis aviar.
Se logró el desarrollo de modelos experimental para la reproducción de la
tifosis y paratifosis en pollos, gallos y gallinas ponedoras de distintas
edades. Se determinó la dosis letal y se estandarizaron las condiciones de cada
ensayo. Se demostró un aumento de virulencia de las cepas de Salmonella
empleadas mediante pasajes por aves, de modo que se establecieron parámetros de
conservación de cepas liofilizadas o congeladas con un número fijo de pasajes in
vitro, para efectuar estudios comparativos de patogenicidad con cepas de
virulencia estandarizada. Se estandarizaron técnicas rápidas de recuento de
Salmonella en hígados. Se realizaron estudios sobre la contaminación de huevos
con Salmonella Enteritidis y su prevención mediante vacunas. Se logró elaborar
extractos de inmunoglobulinas de yema de huevo (IgY) a partir de yemas. Se
completaron estudios moleculares de PCR mediante una tesis de la Universidad
Nacional de Mar del Plata con trabajos conjuntos con el Proyecto PROPAPA del
INTA, lográndose un novedoso método rápido de diagnóstico. Se recibieron cepas
del INTA de Concepción del Uruguay para su estudio. Actualmente se están
poniendo a punto modelos de infección para evaluar probióticos del Centro de
Referencia de Lactobacilos (CERELA) como flora competitiva para prevenir las
salmonelosis. Se efectuaron publicaciones técnicas nacionales e internacionales
y otras se encuentran en preparación
c. Acción combinada de alimentos probióticos y eubióticos para combatir
salmonelosis aviarias (PICT 2001 N° 09-09645)
En la EEA Balcarce se evaluará el efecto preventivo frente a desafíos con
cepas regionales de primo-aislamiento de Salmonella Enteritidis, Salmonella
Typhimurium, Salmonella Gallinarum biovares gallinarum y pullorum. Además, se
determinará el posible efecto de la alimentación propuesta sobre el rendimiento
de la producción aviar. Se realizaron ensayos preliminares para determinación de
un modelo experimental de infección con Salmonella gallinarum y Salmonella
Enteritidis en pollitos BB.
TECNOLOGÍA IgY Ó INMUNOGLOBULINAS DE YEMA DE HUEVO
a. Mejora de los métodos de extracción y purificación
Los objetivos son la obtención de proteínas bacterianas con capacidad ligante
de IgY, desarrollo y optimización de un método de purificación de IgY basado en
cromatografía por afinidad, selección y caracterización de una proteína ligante
de IgY e identificación de su lugar de unión, desarrollo y obtención de
productos específicos de IgY para inmunoprofilaxis, desarrollo de métodos
serológicos para detectar IgY, medir el nivel de IgY.
Las cepas candidatas fijadoras de IgY fueron analizadas mediante distintas
pruebas:
- Pruebas inmunoenzimáticas, análogas a pruebas de ELISA.
- Electroforesis en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE)
- Inmunobloting y Western Blot.
- Electroforesis en dos dimensiones.
- Filtración molecular en geles de Sepharosa.
Como producto de estos análisis se seleccionó una de estas siete cepas, que
se encontró persistentemente positiva a los propósitos buscados. Esta cepa,
aislada a partir de muestras de suelo, fue biotipificada clasificada dentro del
grupo de Serratia liquefasciens.
Como consecuencia de todos los estudios realizados, se logró detectar una
proteína que presenta alta afinidad con la IgY. Aún quedan pendientes estudios
detallados que permitan la identificación de esta proteína, mediante su
secuenciación, así como también la determinación del sitio de unión a la
inmunoglobulina.
Como trabajo complementario, se compararon varios métodos de purificación de
IgY a partir de yema de huevo. Las muestras fueron purificadas en Argentina y
analizadas en Alemania mediante pruebas de ELISA, SDS-PAGE y Western Blot. Como
producto de esta investigación paralela, se determinó que la metodología que
combina la utilización de polietilénglicol y ácido octanoico es la más adecuada,
rápida y eficiente. Esta metodología perfeccionada ha sido adoptada por el grupo
de investigadores alemanes, en reemplazo de otros procedimientos más tediosos.
b. Timulina
Se continuó colaborando con el Dr. Rodolfo Goya (INIBIOLP, Facultad de
Medicina, Universidad Nacional de La Plata) para la producción de IgY específica
anti-timulina, que ha sido utilizada para el estudio de la función de la hormona
timulina, mediante ensayos de inmunoneutralización in vivo en ratas.
c. Prevención de caries
Se colaboró con trabajos de la tesis Doctoral de la Odontóloga Soledad Pérez
Lozano que fue presentado y aceptado en la Facultad de Odontología de la UBA
sobre el empleo de la IgY para prevenir las caries. Hasta la fecha se han
aislado 4 cepas de Streptococus mutans, principal agente causal de la caries,
para la elaboración de vacunas con las que se inocularán gallinas. La IgY
específica que se obtendrá será utilizada para realizar ensayos tanto in vitro
como in vivo, evaluando la posibilidad de utilizar IgY para la inmunoprofilaxis
de la caries humana.
d. Inmunoprofilaxis
Para trabajos generales de inmunoprofilaxis que puedan realizarse en el
futuro, se evaluaron dos métodos de producción industrial de huevo en polvo. Se
comparó un método estándar con otro modificado para obtener huevo granulado
fluido, que se diluye más fácilmente. Se determinó mediante una prueba
cuantitativa de ELISA que el huevo en polvo modificado tiene una concentración
de sólo 1,8 mg de IgY por gramo de huevo en polvo, mientras que por el método
tradicional se obtuvieron 4,8 mg de IgY por gramo. Por lo tanto lo ideal para
preservar a la IgY es el empleo del spray tradicional.
Se finalizaron los ensayos con tratamientos con huevo fresco agregado al
sustituto lácteo de terneros criados en “guacheras” de tambo. Los terneros
tratados con huevos obtenidos a partir de gallinas hiperinmunizadas contra rota
y coronavirus, Escherichia coli enterotoxigénica con fimbria F5 (K99) y
enteroinvasiva con antígeno CS31A y Salmonella enterica serovares Dublin y
Typhimurium, presentaron significativamente menor número de episodios diarreicos
y ausencia total de reincidencia de la enfermedad en comparación con otros dos
grupos de terneros que no recibieron huevos ó recibieron huevos de gallinas no
hiperinmunizadas.
Se inocularon gallinas con 20 cepas humanas de Campylobacter jejuni y C. coli
y con una cepa de Vibrio cholerae, en colaboración con el Instituto Nacional de
Microbiología Carlos G. Malbrán. Estas inmunoglobulinas serán utilizadas durante
el año 2004 para la producción de reactivos inmunofluorescentes para el
diagnóstico rápido de estos vibriones y para la detección de formas viables no
cultivables del vibrión colérico. Esta colaboración, destinada a la elaboración
de reactivos de diagnóstico, es de suma importancia ya que permitirá la
adquisición de experiencia, que podría destinarse a futuros trabajos de
inmunoprofilaxis para la prevención de diarreas infantiles.
e. Control Biológico de la Loque Americana.
El objetivo es desarrollar y evaluar nuevas metodologías biológicas para el
control de la Loque Americana basados en el comportamiento higiénico de la abeja
melífera y la administración oral de flora normal, inmunoglobulinas específicas
de yema de huevo de gallina (IgY) y/o vacunas contra P. larvae
Se logró la estandarización y optimización de la esporulación in vitro de P.
larvae. Se desarrolló y estandarizó un método de recuento de esporas viables. Se
estandarizó un modelo de infección experimental in vivo de la Loque Americana en
larvas de abeja, estimando la Dosis Infectiva Mínima por larva. Se aislaron
cepas de P. larvae a partir de muestras enviadas por productores, para formar un
cepario. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria de antimicrobianos
sobre el crecimiento de P. larvae, determinando la resistencia y sensibilidad de
diferentes cepas. Se aislaron bacterias lácticas a partir de muestras de pan de
abeja, larvas y adultos. Se comenzaron trabajos para la inmunización de gallinas
y se optimizaron técnicas de extracción de anticuerpos a partir de yema de
huevo, como producto de la colaboración con la Universidad de Humboldt-Berlin
(Proyecto Bilateral SECTIP-BMBF AL/PA/00-BVIII/006AR). Este método será empleado
para la obtención de anticuerpos para la inmunoprofilaxis y diagnóstico de la
enfermedad. Se aislaron compuestos fúngicos con actividad anti-P. larvae. Se
comenzaron los ensayos para evaluar la influencia del comportamiento higiénico
CORIZA INFECCIOSA DE LOS POLLOS
Se evaluó la protección de 4 vacunas comerciales comparando su protección
frente a desafíos con una vacuna experimental del INTA de Balcarce elaborada con
la misma cepa de desafío y se perfeccionarán los métodos de evaluación de los
ensayos mejorando y adaptando medios de cultivo y técnicas bacteriológicas de
aislamiento.
Ciento veinticinco gallos fueron divididos en seis grupos. Cuatro de los
grupos fueron vacunados con 4 distintas vacunas comerciales (denominadas 1, 2, 3
y 4). Otro grupo fue vacunado con una autovacuna preparada con la cepa de
desafío. Las aves fueron vacunadas intramuscularmente a la 6º y 12° semana de
vida. El grupo restante no fue vacunado (grupo control). Todos los gallos fueron
desafiados con Haemophilus paragallinarum (HPG) serovariedad B, cepa INTA H8.
Todas las vacunas fueron capaces de proteger a las aves en forma moderada
disminuyendo la difusión de la infección desde el seno infra-orbitario derecho
(inoculado) al izquierdo (sin inocular). La autovacuna confirió mejor protección
que cualquiera de las cuatro vacunas comerciales estudiadas. Los signos clínicos
fueron registrados al segundo día post-desafío (PD) y demostraron que las
vacunas 2 y 3 brindaron más protección que las vacunas 1 y 4. El porcentaje de
aislamiento de HPG al 5° día PC fue significativamente más bajo (p<0.05) en
todos los grupos vacunados en comparación con el grupo control sin vacunar. Se
encontró una correlación estadísticamente significativa entre los signos
clínicos y el porcentaje de aislamiento de HPG. Un análisis combinado de
protección mostró que la vacuna comercial 3 fue la única que brindó cierto grado
de protección, a pesar que no fue tan buena como la protección lograda por la
autovacuna. En el otro extremo la vacuna comercial 1 no brindó ninguna
protección. Las otras dos vacunas comerciales se clasificaron dentro de un rango
intermedio de protección. La vacuna comercial 2 logró la disminución de los
signos clínicos PD pero fue incapaz de evitar la infección por HPG. Basados en
estos resultados se recomienda mejorar a las vacunas comerciales mediante la
inclusión de nuevas serovariedades B sin dejar de considerar la posibilidad de
seleccionar provisionalmente a la vacuna comercial 3 para todas aquellas
regiones en las cuales la serovariedad B prevalece.
ENFERMEDADES PARASITARIAS DE LOS RUMIANTES
Resistencia parasitaria a drogas antihelmínticas en rumiantes. El objetivo es
medir la eficacia de drogas antiparasitarias. Luego de numerosos años de uso
indiscriminado se determinó en numerosos países resistencia de los parásitos a
varias familias de drogas. Este proyecto forma parte de un programa nacional e
internacional (FAO) para caracterizar la distribución de la resistencia en
distintos continentes. Se realizó el test de reducción de huevos de parásitos en
6 majadas de ovinos y 3 rodeos bovinos de la región identificándose 5 de ellos
con resistencia a varias drogas. Se produjo un folleto para productores. Se
continúan las acciones.
FIEBRE AFTOSA
Monitoreo y vigilancia de la fiebre aftosa
Las actividades de este proyecto se concentraron en el programa nacional de
vigilancia epidemiológica del SENASA integrando una comisión ad hoc responsable
del diseño y análisis de los muestreos seroepidemiologicos anuales para evaluar
la actividad viral y la inmunidad poblacional. Los resultados fueron presentados
por la comisión a la misión de la Unión Europea en diciembre 2002 y se publico
en un Boletín del SENASA. La actividad viral en las distintas regiones del pais
estuvo relacionada a la presencia de focos en la epidemia 2001/2. los niveles de
inmunidad poblacional son aceptables en la Pampa Humeda pero existen regiones
con baja inmunidad atribuibles a campañas de vacunación deficientes en la region
extrapampeana.
ENFERMEDADES VIRALES DE LOS BOVINOS
a. Evaluación de vacunas experimentales del virus de la diarrea viral bovina
en bovinos, ovinos y cobayos. (Colaboración).
El control de la diarrea viral
bovina se fundamenta en la detección y eliminación de animales PI y en la
estimulación de la producción de Ac neutralizantes a través de la utilización de
vacunas. En Argentina sólo está autorizado el uso de vacunas inactivadas, siendo
su eficacia muy discutida debido, principalmente, a su baja inmunogenicidad. En
este trabajo se formularon 7 vacunas oleosas experimentales. Grupos de bovinos,
ovinos y cobayos fueron inoculados con dos dosis de vacuna con un intervalo de 4
semanas. Los sueros obtenidos a diferentes tiempos post-vacunación fueron
procesados por seroneutralización (SN). A excepción de las vacunas 5 y 6, todas
las formulaciones indujeron seroconversión en los tres modelos animales,
alcanzando títulos neutralizantes superiores a 2, los que se mantuvieron hasta
los 180 días post-vacunación para el modelo ovino y cobayo. Asimismo, los
bovinos de estos grupos presentaron una respuesta homogénea tanto con las cepas
homólogas como heterólogas, indicando una alta reactividad cruzada entre las
mismas. El alto grado de correlación observado entre el modelo bovino-ovino y
bovino-cobayo indica que estas especies podrían ser de utilidad para realizar
controles de calidad inmunogénica de las vacunas de DVB. La diferencia en la
respuesta observada entre la vacuna con alto título del VDVB, y de las vacunas
con bajo título, sugiere que la concentración de antígeno sería el factor
determinante relacionado con la calidad inmunogénica de las vacunas inactivadas
de DVB.
b. Evaluación de una vacuna experimental recombinante del virus de la diarrea
viral bovina. (Colaboración).
El objetivo del proyecto es el desarrollo y
evaluación de una vacuna recombinante formulada con una glicoproteína del VDVB.
En la EEA Balcarce se están realizado las pruebas de campo para la valorar la
capacidad de protección de la vacuna en bovinos inmunizados y desafiados. Se
utilizaron 10 bovinos seronegativos al VDVB, de 12 meses de edad, asignados a
los siguientes tratamientos: Grupo A: seis animales inmunizados con la vacuna
recombinante; Grupo B: dos animales vacunados con vacuna comercial y Grupo C:
dos animales controles, seronegativos, no vacunados. Los animales del Grupo A y
B recibieron dos dosis de las respectivas vacunas por vía SC con un intervalo de
21 días. La segunda dosis fue administrada 21 días antes de la infección
experimental con VDVB. Los animales de los 3 Grupos fueron desafiados
intranasalmente con VDVB- NADL. Todos los animales fueron controlados
clínicamente y muestreados diariamente durante 15 días post-desafío. El desafío
se realizó recientemente por lo que a la fecha se está en la etapa de muestreo y
análisis de laboratorio de las muestras. Se puede anticipar que no se observaron
diferencias significativas en los registros de temperatura corporal de los
grupos experimentales durante los días de observación. En 6 animales, dos de
cada Grupo, se detectó secreción nasal mucosa y diarrea leve e intermitente.
TECNOLOGÍA SIG PARA EL ANALISIS DE DATOS DE SANIDAD ANIMAL
El objetivo del proyecto es identificar patrones temporo-espaciales en la
distribución de las enfermedades. Sobre una base de datos de 7000 protocolos
registrados en papel (años 1994-2003) se está sistematizando en una base de
datos la información y georeferenciando la ubicación de los establecimientos
para poder ser visualizada mediante un SIG (sistema de información geográfico) y
analizada con métodos estadísticos apropiados (e.g. SaTScan) .
PROGRAMA DE INTERACCION PROFESIONAL
El objetivo es fortalecer la relación entre el sector privado y el sector de
investigación y extensión del INTA y la industria veterinaria (en conjunto con
la Unidad Operativa Cuenca del Salado)
Se recibieron planillas de 81 veterinarios con información de 1066 casos de
enfermedades de rumiantes. Se realizaron 4 Informes sanitarios trimestrales y un
Boletín anual, enviados por correo y email a los veterinarios informantes y se
lo incluyó en la página de Internet del Grupo (www.inta.gov.ar/balcarce/gsa).
Se realizaron 13 talleres técnicos para profesionales y a continuación se
repitieron para productores en distintos partidos de la Cuenca del Salado. Se
presentaron dos temas: análisis de año de información sanitaria en la Cuenca y
prevención y control de las principales enfermedades registradas en este
sistema. Asistieron 150 veterinarios y 203 productores. Se realizaron tres
Jornadas Técnicas de actualización sobre enfermedades de la reproducción de los
bovinos en Dolores, Chascomús y Azul a las que asistieron 57 veterinarios.
Balcarce, marzo 2004
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