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La conservación de las muestras se realiza según la
especie y el tipo de material recolectado.
Especies silvestres y cultivadas de papa
Las especies silvestres de papa se conservan como
semilla sexual, ya que es una especie que se comporta como ortodoxa y por
lo tanto las semillas se pueden secar hasta contenidos de humedad del 4-9%
y almacenar a bajas temperaturas (4°C-6%) por un largo período de tiempo.
En cambio las especies cultivadas de papa se conservan en forma de
tubérculos o in vitro, mediante la incorporación de tejido
meristemático a un medio de cultivo con retardantes osmóticos que limitan
la disponibilidad de nutrientes disminuyendo así el crecimiento de la
plántula. Además se colocan bajo condiciones controladas de luz y
temperatura y de esta manera el material se renueva cada 6 o 12 meses.
Se ha iniciado la crioconservación del material
vegetal, es decir el almacenamiento a ultra baja temperatura (-196°C) en
nitrógeno líquido. Esta técnica permite conservar germoplasma por un mayor
período de tiempo que la anterior sin la necesidad de renovaciones
semestrales y a un costo de mantenimiento menor.
La regeneración de las colecciones mantenidas en el
banco se realiza cuando el poder germinativo de las muestras almacenadas
es inferior al 85% o si se dispone de una cantidad insuficiente de
semillas. Los análisis de germinación se efectúan siguiendo las normas de
la Asociación Internacional de Ensayos de Semillas (ISTA, 2004).
Para regenerar la colección se utilizan 25 a 30
plantas por entrada que se mantienen en una jaula antiáfidos y se efectúan
cruzamientos entre plantas hermanas. Se obtienen alrededor de 5000 semillas por
cada entrada regenerada.
Especies forrajeras
Las especies forrajeras conservadas en el Banco de
Germoplasma poseen semillas de comportamiento ortodoxo, por lo que las
semillas se pueden secar hasta contenidos de humedad del 4-9% y almacenar
a bajas temperaturas (4°C-6%).
Para iniciar la conservación de las mismas,
previamente son secadas hasta un 5-8% de su contenido de humedad; luego
son acondicionadas en sobres trilaminados termosellados, que impiden el
intercambio gaseoso con el medio y finalmente éstos se disponen en una
cámara a baja temperatura (4ºC). Este procedimiento se realiza de acuerdo
a las normas aconsejadas internacionalmente (Normas para Bancos de Genes,
1994. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentación, Roma, Instituto Internacional de Recursos Filogenéticos,
Roma).
Al trabajar con semillas pequeñas, las muestras se
secan en desecadores con sílica gel inmediatamente después de haber sido
recibidas, a fin de evitar el deterioro de las mismas. La desecación se
realiza manteniendo la semilla entre 15-20ºC y a una humedad relativa del
aire de secado de 15-20%. La duración del
período de desecación depende del tamaño de la semilla, de la cantidad
desecada y del contenido inicial de humedad de las semillas. Se han
diseñado curvas de secado para distintas especies.
Se determina la viabilidad de las semillas según las
normas de la Asociación Internacional de Ensayos de Semillas (ISTA, 2004). Se establece para cada especie las condiciones óptimas de
germinación, en función de variables como sustrato, temperatura,
iluminación y tratamientos para romper la dormición. Para colecciones de
germoplasma se acepta la utilización de cuatro repeticiones de 25 semillas
cada una. Las condiciones óptimas de germinación dependen de la especie y
será necesario establecerlas mediante ensayos secuenciales de temperatura
y horas luz/oscuridad cuando no se dispone de la información.
La viabilidad normalmente se determina al recepcionar
las muestras pero se requiere llevar a cabo controles periódicos durante
el período de almacenamiento. Estos controles periódicos dependerán de la
especie, de las condiciones de almacenamiento de las semillas y del
porcentaje inicial de germinación. La finalidad de estos controles de la
viabilidad, es determinar cuáles entradas necesitan ser regeneradas.
Regeneración: esta actividad es fundamental
para las colecciones mantenidas en los bancos. No todas las muestras que
se conservan en el RBG pueden ser regeneradas en los sitios donde se
localiza el Banco, ya que para determinadas especies a veces es necesario
recurrir a ambientes especiales como valles de altura. Para cada especie
es necesario un protocolo de regeneración que evite la deriva génica y que
se asegure que la constitución genética de la muestra regenerada sea
idéntica a la muestra original.
Se dispone de un Catálogo del
Material del Herbario BAL que incluye material de referencia de cada
entrada.
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